蛋白毛细管等电聚焦电泳实验方法及检测报告模板

1. 缩略语及定义

1.1. cIEF：毛细管等电聚焦电泳；

1.2. Arg：精氨酸；

1.3. IDA：亚氨基二乙酸；

1.4. Ampholyte：两性电解质。

2. 内容Content

2.1. 仪器

表 1. 实验仪器设备

仪器名称

规格/型号

生产厂家

毛细管电泳仪

CE 7100

Agilent

毛细管(涂层)

usilFC，内径50μm，切割至总长为33cm，有效长度24.5cm

Agilent

2.2. 试剂

氢氧化钠（AR）、乙酸（AR）、亚氨基二乙酸（Aladdin，AR）、精氨酸（Aladdin，AR）、尿素（Aladdin，AR）、磷酸（Aladdin，AR）、cIEF胶（BioCEart）、pI marker（BioCEart）、两性电解质3-10（cytiva）。

2.3. 样品制备

Urea-gel4M

Arg0.5M

两性电解质

pI（10、7.0、5.5）

IDA0.2M

Sample（2mg/ml）

150μL

20μL

12μL

1μL

12μL

5μL

3. 检验操作

3.1. 按下列设置进行毛细管电泳系统的参数设置

表 2. Agilent CE7100的参数设置

模式

毛细管电泳

检测波长/参比波长

280nm；550nm

带宽/参比带宽

4nm；50nm

毛细管卡盒/支架盒温度

25℃

样品温度

15℃

进样

2.0bar气压，99s

分离

40min

4. 结果

在15~40min间自动积分，得到pI marker的信号峰，且pI marker的出峰顺序依次为10、7.0和5.5。根据以上pI marker的等电点与其对应的迁移时间做校正曲线，且R2大于0.99，使用该校正曲线得到供试品的等电点。结果如下。

样品名称

R2

pI范围

主峰pI（响应最高）

碱峰

主峰

酸峰

sample

1.00

8.1-8.9

8.7

3.43

55.41

41.16

项目内容

广州如期生物技术有限公司成立于2016年，始终以探索科学、服务客户为己任；致力于为高校、科研院所、医院、制药企业提供全面、便捷、专业的技术服务和产品。技术方面我们专注于生物医学领域：公司拥有完善的技术服务平台，覆盖分子生物学，转录组学、代谢组学、蛋白组学，表观遗传等多个科研平台。在产品方面，自主研究多种类型科研试剂盒20多项，如：COIP、CHIP、RIP等科研检测试剂盒，较之同类型的进口试剂盒，极大的降低了科研成本。

公众号：如期生物

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